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实验材料: 斑马鱼各时期cDNA 

实验步骤:                10xPCR buffer                       2ul 

                                   dNTPs(10mM)                    0.3ul 

                                   Primer detect forward      0.2ul 

                                   Primer detect Reverse      0.2ul 

                                   DNA聚合酶                           0.3ul 

                                   纯水                                       17ul 

                                   总体积                                    20ul 

PCR程序如下: 

(1)预变性:94℃,5min; 

(2)变性:94℃,30s; 

(3)退火:56℃,30s; 

(4)延伸:72℃,1kb/min(根据实际片段大小); 

(5)重复第2-4步,30-35个循环; 

(6)终延伸:72℃.10min; 

(7)4℃恒温。 

在斑马鱼上可以利用反转录PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)或者荧光实时定量PCR(Quantitative Real-time PCR)检测特定基因在特定时期的表达情况。 

RT-PCR 实验周期:1周 

用鱼:一个样品组30尾。