药效评价

P-糖蛋白(P-gp)抑制剂筛选:    阅读次数:3011

化疗是治疗癌症的重要手段,但化疗中常见且难以解决的问题是肿瘤多药耐药性(Multidrug resistance, MDR)的产生。P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)高表达是MDR的形成最主要机制之一,P-gp为跨膜糖蛋白,是肿瘤细胞多药耐药基因MDR1的表达产物,能够与进入细胞浆的抗肿瘤药物结合,将药物从细胞内泵出细胞外,导致肿瘤细胞内药物浓度降低、细胞毒或靶向治疗作用减弱或丧失,进而使肿瘤细胞产生耐药性。因此应用P-gp抑制剂是逆转MDR的一个重要手段。近年来,评价与筛选P-gp抑制剂已成为抗肿瘤药物研究的前沿热点之一。 

系统发育学研究证实斑马鱼具有52个ABC转运基因,包括人类所有的48个ABC转运基因,斑马鱼ABC基因与人类ABC基因的同源性高达77%,两者具有一一对应的关系[1]。环特生物建立了整体斑马鱼P-gp抑制剂筛选模型,通过基于图像或微孔板检测的方法可以快速、高效地进行P-gp抑制剂体内筛选,预测性好、可比度高。 

选取特异性荧光染料可以有效的筛选出P-gp抑制剂,因为正常斑马鱼会将此荧光染料泵出体外,而P-gp活性受到抑制的斑马鱼无法正常排出染料后荧光强度增强。环特生物通过这一原理成功摸索出了斑马鱼P-糖蛋白(P-gp)抑制剂筛选模型,并用阳性药环孢菌素A和维拉帕米成功地进行了模型的验证。

 

 ▲加药后荧光强度明显↑,P-gp活性受到抑制 


 ▲相关基因检测 


 ▲相关蛋白检测