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【评价原理】
OECD近年大力推崇的“有害结局路径”(Adverse Outcome Pathway,AOP)毒性评估策略来测试类雌激素这一大类有害物质。本方法参照粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO,2000)关于类雌激素物质最高日摄取量来评估测试物的安全性,通过转基因标记技术表达的绿色荧光蛋白含量来量化类雌激素物质含量,绿色荧光蛋白特异性地在肝脏表达,一旦供试品中含一定量的类雌激素化学物质,雌激素转基因斑马鱼暴露后肝脏部位会出现绿色荧光,可用绿色荧光量化供试品中的类雌激素物质含量,从而达到检测效果。
【实验方案】
我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。
摄入供试品一段时间后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肝脏荧光。
【结果展示】
图1.含类雌激素物质的供试品处理后斑马鱼荧光表型图
黄色曲线部位为肝脏,绿色荧光量化类雌激素含量
可以看到,摄入供试品组肝脏部位有明显的绿色荧光。
【评价结论】
1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,摄入含类雌激素物质的供试品组斑马鱼肝脏荧光明显,与正常对照组存在明显差别。
2.本实验证实了该供试品含有类雌激素物质。