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【评价原理】
人类皮肤衰老的原因分为内源性和外源性,外源性主要包括日晒、氧化和糖化。这里的糖化是指蛋白非酶糖基化反应,即在非酶促条件下,蛋白质、氨基酸、脂类或核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖的羰基经过缩合、重排、裂解、氧化修饰等一系列反应,最终形成晚期糖基化终产物(AGEs)。AGEs与皮肤衰老密切相关,过量的AGEs可以与皮肤弹性纤维、胶原蛋白发生糖化交联反应,并且AGEs呈棕色,最终使皮肤表现黄化、弹性降低。
常规的AGEs具有荧光特性,可利用葡萄糖与牛血清蛋白在体外发生糖化反应生AGEs的原理进行造模处理,加入抗糖化产品后通过荧光定量方法评价其抑制AGEs的水平来反映其抗糖化功效。
我们评价斑马鱼抗糖化功效有1个指标:1.AGES荧光值。
【实验方案】
我们将实验分为六个组,分别是正常对照组、模型对照组、阳性对照组、供试品低浓度组、供试品中浓度组和供试品高浓度组。模型对照组加入葡萄糖溶液,阳性对照组加入葡萄糖和阳性对照药,不同浓度供试品组加入葡萄糖和待检测供试品,在60℃下孵育一定时间,用酶标仪在370nm/440nm的荧光检测条件下检测AGEs的含量变化,从而反映待检测供试品是否具有抗糖化功效。
【结果展示】
图1. 斑马鱼AGEs荧光值
【评价结论】
1.供试品组AGEs与正常对照组相似,较模型对照组的AGEs荧光值下降,证实供试品具有抗糖化作用。
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