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【评价原理】
斑马鱼体内本身有氧自由基(ROS),用CM-H2DCFDA与斑马鱼体内的ROS反应,检测反应后荧光产物的荧光值。CM-H2DCFDA是一种常用氧化应激指示剂,在细胞内水解成DCFH,DCFH为极性化学物质,能够在细胞内保留较长时间。当细胞产生氧化型物质时,DCFH会被氧化为高荧光强度的DCF(二氯荧光素)。斑马鱼体内的ROS水平越高,氧化产生的DCF就越多,荧光信号越强。
我们评价斑马鱼抗氧化功效有1个指标:1.ROS水平。
【实验方案】
将受测试斑马鱼分成两组,含正常对照组和供试品组。其中正常对照组未经任何处理,,供试品组加入供试品。处理一段时间后,将斑马鱼进行CM-H2DCFDA工作液定容,在酶标仪上读取ROS荧光值。
【结果展示】
图1. 斑马鱼体内ROS水平(荧光值)
可以看到,供试品组相对正常对照组ROS荧光值显著减少。
【评价结论】
1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,供试品组相对正常对照组ROS荧光值显著减少,证实供试品具有抗氧化作用。
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