利用斑马鱼模型评价口服美白功效

【评价原理】

黑色素生成途径与人保守，黑色素生成过程相关基因（如tyr、mitf、sox10和dct）与人同源。斑马鱼胚胎发育至24 h时黑色素开始从视网膜上皮生长。色素细胞（包括黑色素细胞、黄素细胞和虹彩细胞）起源于背部外胚层分化的一群细胞—神经嵴细胞，然后增殖、迁徙、分化成色素母细胞。其中黑色素细胞合成黑色素，类似于脊椎动物的黑色素细胞。黑色素是皮肤颜色的主要决定因素，它能保护皮肤免受外界的不利刺激，如紫外线辐射。在紫外线辐射的反应中，皮肤和脑垂体产生黑素细胞刺激素（α-MSH），它是介导黑色素细胞产生黑色素的开始。随后，α-MSH与黑素皮质蛋白1受体（MC1R）结合，通过腺苷酸环化酶刺激下游信号通路。特别是腺苷酸环化酶催化三磷酸腺苷转化为环磷酸腺苷，进而产生蛋白激酶A-cAMP反应元件结合蛋白轴，该轴主要被认为通过反激活MITF来促进黑色素生成，从而使皮肤和毛发颜色加深。在黑色素形成的过程中进行干预，可以抑制黑色素的形成。tyr是酪氨酸酶基因，主要参与黑色素的合成；酪氨酸酶是黑色素合成途径中的限速酶，主要通过影响酪氨酸转化成多巴，以及多巴氧化为多巴醌来影响黑色素的生成。α-MSH处理斑马鱼，诱导黑色素生成增多。斑马鱼胚胎发育早期透明，在显微镜下可直接观察到斑马鱼表皮的黑色素，可用于评价供试品美白功效。

我们评价斑马鱼口服美白功效有4个指标：1.头部黑色素信号强度；2.整体黑色素蛋白含量；3. 整体酪氨酸酶活性；4.qPCR检测相关基因表达量：酪氨酸酶基因tyr。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未显微注射α-MSH，模型对照组与供试品组都显微注射α-MSH。供试品组同时摄入供试品。

口服一段时间供试品后，我们在显微镜下观察斑马鱼头部黑色素信号强度。

【结果展示】

图1 斑马鱼头部黑色素信号强度典型图

可以看到，模型对照组斑马鱼头部黑色素信号强度增加，供试品组相对模型组头部黑色素信号强度显著减少。

【评价结论】

1.供试品组斑马鱼头部黑色素信号强度与正常对照组相似，较模型对照组的头部黑色素信号减小，证实供试品具有口服美白功效。

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