利用斑马鱼模型评价增加皮肤弹性功效

【评价原理】

皮肤真皮结缔组织由细胞成分和细胞外基质（ECM）组成。胶原蛋白和弹性蛋白分别占皮肤干物质的70%和2-5%，是生物体ECM中的重要组成成分。胶原蛋白由成纤维细胞分泌后，交联成纤维网状结构的胶原纤维，是皮肤主要的抗压物质，能保持皮肤的韧性。I型胶原蛋白是由两条α1链和一个α2链组成的三股螺旋分子，分别由COL1A1和COL1A2基因编码，斑马鱼基因col1a1a、col1a1b与人类I型胶原蛋白基因COL1A1同源。弹性蛋白与胶原蛋白一样，由成纤维细胞合成，并以弹性纤维的形式存在于ECM中。弹性纤维缠绕在胶原纤维周围，具有高度的延伸性和韧性，能赋予皮肤较强的弹性和反冲力，负责将变形后的皮肤恢复到正常形态。斑马鱼基因elna、elnb与人类弹性蛋白基因ELN同源。皮肤松弛缺乏弹性的原因是皮肤真皮层中的胶原蛋白和弹性蛋白在基质金属蛋白酶水解下发生断裂，松散并紊乱地沉积在皮肤的ECM中，无法为皮肤提供足够的机械支持。通过检测皮肤Ⅰ型胶原蛋白（col1a1a、col1a1b）和弹性蛋白（elna、elnb）基因相对表达量来评价样品是否具有增加皮肤弹性功效。

我们评价斑马鱼增加皮肤弹性功效有2个指标：1.Ⅰ型胶原蛋白（col1a1a、col1a1b）基因相对表达量；2.弹性蛋白（elna、elnb）基因相对表达量。

【实验方案】

将受测试斑马鱼分成若干组，含正常对照组和供试品组。其中正常对照组未经任何处理，供试品组添加受试化妆品。加入化妆品24 h后，对每组斑马鱼进行收样，使用试剂盒提取RNA，使用q-PCR检测目的基因的转录水平，通过斑马鱼胶原蛋白基因相对表达量评价供试品抗皱功效。

【结果展示】

图1. 斑马鱼体内col1a1b基因相对表达量

可以看到，供试品组相对正常对照组col1a1b基因相对表达量显著增加。

【评价结论】

1.供试品组斑马鱼体内col1a1b基因相对表达量与正常对照组相比显著增加，说明该供试品具有增加皮肤弹性功效。

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