利用斑马鱼模型评价抗糖化功效

【评价原理】

蛋白质糖基化(glycosylation)是最常见但也是最复杂的翻译后修饰之一,未成熟蛋白质与糖分子通过特定酶促反应发生糖基化反应,形成具有功能的成熟蛋白质,这种酶促反应糖基化对蛋白质的功能和稳定性等具有重要作用。与蛋白质糖基化相似但又不同的糖化反应(Glycation),是一种自发的非酶促的不可逆反应,会随着年龄的增加而增加,与衰老显著相关。糖化会造成糖和蛋白质交联,能使正常的蛋白结构转变成老年蛋白的结构,造成蛋白结构异常和功能障碍,从而引发机体衰老。紫外线照射可激发皮肤的氧化应激反应,进而引起皮肤的非酶糖化反应,产生糖基化终产物( Advanced glycation end product,AGEs)。此外,紫外线又利用AGEs的特性促进氧化应激反应,造成皮肤氧化损伤,加速皮肤光老化,如皮肤黑色素细胞增加,色素分布不均匀,角质层加厚等。研究表明,D-半乳糖诱导的衰老(非糖尿病)大鼠血浆中的糖化血红蛋白和AGEs的含量均显著升高,说明糖化血红蛋白与衰老直接相关。

我们评价斑马鱼抗糖化功效有1个指标:1.整体糖化血红蛋白含量。

【实验方案】

我们将实验分为六个组,分别是正常对照组、模型对照组、阳性对照组、供试品低浓度组、供试品中浓度组和供试品高浓度组。模型对照组进行紫外线照射,阳性对照组进行紫外线照射并给与阳性对照药,不同浓度供试品组进行紫外线照射并给与待检测供试品,处理一定时间后,用酶标仪检测糖化血红蛋白含量变化,从而反映待检测供试品是否具有抗糖化功效。

【结果展示】

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图1. 斑马鱼糖化血红蛋白含量

可以看到,模型对照组糖化血红蛋白含量明显上升,供试品组相对模型组显著降低糖化血红蛋白含量。

【评价结论】

1.供试品组糖化血红蛋白含量与正常对照组相似,较模型组的糖化血红蛋白含量下降,证实了供试品具有抗糖化作用。

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